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细胞嵌入皿常见问题

2021-11-12

怎样选择嵌入皿小室产品的孔径??? ??

首先需要明确您所举行的应用是否需要细胞穿过小室膜上的孔 。。。。。一样平常来说,,,,,,,,共作育实验、Caco-2 Transport实验及构建细胞极化模子等不需要细胞穿膜,,,,,,,,大多选择0.4μm等小孔径的产品 。。。。。而在细胞迁徙实验及侵袭实验中,,,,,,,,细胞则需要穿过上室的膜、抵达膜的背侧(少数情形下会落至下室中,,,,,,,,如悬浮细胞的迁徙/侵袭实验),,,,,,,,因此需要选择较大孔径,,,,,,,,(如肿瘤细胞的迁徙、侵袭实验常选择8μm孔径的产品) 。。。。。

怎样挑选小室膜的材质??? ??

洁特小室有聚碳酸酯(Polycarbonate, PC),,,,,,,,聚酯(Polyesteror PolyethyleneTerephthalate,,,,,,,,PET)两种膜材质 。。。。。

PC和PET膜材质应用都很普遍,,,,,,,,二者的主要区别在光透性方面,,,,,,,,即PC膜半透明,,,,,,,,不太利便在作育的历程中视察上室细胞的形态;;;;;PET膜透明,,,,,,,,利便在相差显微镜下视察细胞的状态 。。。。。

小室的膜材质与细胞作育皿/瓶差别,,,,,,,,细胞贴壁情形会有什么差别吗??? ??

未包被的小室膜材质(PC或PET)虽与通俗塑料细胞作育皿/瓶的材质(Polystyrene, PS)差别,,,,,,,,但膜的两侧均经由组织作育外貌处置惩罚(TissueCulture Treated, TC Treated),,,,,,,,与一样平常做细胞作育的PS耗材的外貌处置惩罚相同 。。。。。因此,,,,,,,,在正常情形下,,,,,,,,细胞在小室内的贴壁情形应与作育皿/瓶中类似 。。。。。在通俗作育时需包被基质卵白等辅助贴壁的细胞,,,,,,,,在小室上仍然需要包被 。。。。。包被要领类似通俗作育外貌,,,,,,,,可通过小室膜外貌积换算所需包被液的量

小室产品能否灭菌后重复使用??? ??

小室产品为一次性使用的耗材,,,,,,,,不可重复使用 。。。。。小室的孔板和膜的材质均无法遭受高压蒸汽灭菌,,,,,,,,且无法确认重复使用的小室是否被彻底清洁,,,,,,,,因此无法包管重复使用的实验效果 。。。。。

嵌入皿小室是否需要匹配特殊的吸收板/下室产品?

与响应规格的通俗细胞作育多孔板(如TCP010006TCP010012TCP010024等)适配 。。。。。

在接种细胞前,,,,,,,,是否需要举行“水化”??? ??

大大都应用并不需要特殊举行“水化”操作,,,,,,,,该操作主要用于Matrigel预包被的侵袭小室,,,,,,,,在使用前需平衡至室温,,,,,,,,并加入预温至37摄氏度的无血清作育基,,,,,,,,于作育箱中水化两小时 。。。。。

少数情形下,,,,,,,,提前在上下室加入作育基,,,,,,,,并在作育箱中预孵育大于1小时可资助细胞贴壁,,,,,,,,但大大都细胞可以直接接种 。。。。。

接种细胞的加液顺序怎样??? ??

一样平常先将预热的作育基加入多孔板的孔中(下室),,,,,,,,再轻轻将小室放入孔中 。。。。。在放入时,,,,,,,,建议将小室稍稍倾斜,,,,,,,,一侧先接触液面,,,,,,,,以免笔直放入在小室下天生气泡 。。。。。之后便可将混淆匀称的细胞悬液加入小室内部 。。。。。

小室膜上既然有许多小孔,,,,,,,,在包被基质卵白或一些单独加液在上室的情形下,,,,,,,,液体是否会很快漏至下室??? ??

一样平常不会 。。。。。小室的膜上的小孔孔径有限,,,,,,,,在外貌张力的作用下,,,,,,,,加入上室的包被液并不会很快漏下,,,,,,,,若是短时间内发明有液体大宗淌下,,,,,,,,需检查小室的膜是否有裂痕或不完整的情形 。。。。。

共作育实验中,,,,,,,,上下室接种细胞的位置一样平常怎样安排??? ??

由于小室膜上小孔的保存,,,,,,,,上下室的作育基可以交流互通,,,,,,,,接种在上下室的细胞是相互影响的 。。。。。接种细胞的位置安排需思量网络细胞、举行下游检测的利便水平,,,,,,,,同时也需要思量到上下室作育面积的差别(上室的有用生长面积比下室小,,,,,,,,响应地,,,,,,,,接种的细胞量生怕有差别),,,,,,,,您可参考相关文献或举行预实验来最终决议实验安排 。。。。。

小室内接种的细胞能否消化网络??? ??

可以的 。。。。。您可接纳在通俗作育器皿中消化响应细胞的试剂(如胰酶等),,,,,,,,在上下室均加入推荐体积的消化液 。。。。。

对小室内接种的细胞举行药物处置惩罚时,,,,,,,,药物是仅需加入上室吗??? ??

由于小室膜上小孔的保存,,,,,,,,我们建议您在上下室内均加入含有同样浓度药物的作育基,,,,,,,,以确保您的药物处置惩罚浓度 。。。。。

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